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Chirurgie générale · CHAPITRE 6. TRANSFUSION SANGUINE

Détermination du groupe sanguin par sérums tests

In vitro hemagglutination test

La détermination du groupe sanguin à l'aide de sérums isohémagglutinants standard est un examen immuno-hématologique fondamental. La méthode repose sur la réaction d'agglutination et permet d'identifier les antigènes érythrocytaires en vue d'une transfusion ultérieure sécurisée.

Temps d'évaluationLe résultat préliminaire est évalué au bout de 3 minutes, et le résultat définitif au bout de 5 minutes.
ProportionsLe volume de la goutte de sang à analyser doit être 5 à 10 fois inférieur à celui de la goutte de sérum.
TempératureL'examen doit être réalisé strictement à une température ambiante comprise entre 15 et 25 °C.
DocumentationLe résultat est inscrit dans le dossier médical et sur la page de garde, daté et signé par le médecin.
6 min de lecturePour les étudiants en médecineMis à jour le 25.09.2026
Article préparé par édition WhiteCoat Pro selon les supports pédagogiques de la plateformeValidé par le médecin réviseur : Aoulov A. A., médecin généraliste · 24.09.2026

Règles fondamentales de transfusiologie clinique

Selon les normes médicales actuelles, il est permis de transfuser au receveur exclusivement du sang isogroupe (selon le système ABO) et isohémo-compatible pour le facteur Rh.

Cependant, la pratique clinique présente des situations extrêmes dans lesquelles de strictes exceptions sont admises :

  • L'application de la règle d'Ottenberg est possible, impliquant la transfusion de sang d'un donneur universel.
  • La transfusion de sang Rh-positif à un patient Rh-négatif est tolérée, mais en un volume ne dépassant pas 500 ml.
  • Extrêmement important : en pédiatrie, toute exception aux règles de transfusiologie est absolument proscrite. Seul un sang strictement identique doit être transfusé aux enfants.

Des réglementations spécifiques s'appliquent au plasma sanguin. Ainsi, le plasma des groupes A(II) et B(III) peut être transfusé à des patients de groupe sanguin O(I). Si le receveur est du groupe O(I), il peut également recevoir du plasma de son groupe identique O(I).

Exigences relatives aux sérums standard

Pour réaliser l'examen, il est nécessaire de préparer deux kits de sérums pour les trois premiers groupes — I(O), II(A) et III(B), qui doivent impérativement appartenir à des lots différents. Il faut également prévoir une ampoule de sérum IV(AB), un flacon de solution isotonique de chlorure de sodium, des pipettes individuelles pour chaque ampoule, une plaque, des lames porte-objet, des lancettes, du coton et de l'alcool.

Avant de commencer la procédure, le médecin doit vérifier la validité des réactifs. Ceux-ci doivent être conservés au réfrigérateur à une température de 4 à 10 °C.

Critères de validité des sérums :

  • Présence d'une étiquette-notice : elle doit indiquer clairement le groupe, le lot, le titre, la date de péremption et le lieu de fabrication. L'utilisation d'ampoules non étiquetées est strictement interdite.
  • Aspect extérieur : le liquide doit être clair et parfaitement transparent. En cas de turbidité, de flocons, de sédiment ou si la date de péremption est dépassée, le réactif doit être rejeté.
  • Activité : le titre minimal toléré est de 1:32. Les premiers signes d'agglutination des érythrocytes doivent apparaître au plus tard 30 secondes après le mélange.

Code couleur des ampoules :

  • I (O) — liquide incolore, absence de bandes de marquage.
  • II (A) — liquide bleu, l'étiquette comporte 2 bandes bleues.
  • III (B) — liquide rouge, l'étiquette comporte 3 bandes rouges.
  • IV (AB) — liquide jaune, l'étiquette comporte 4 bandes jaunes.
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Méthodologie étape par étape

La réaction est réalisée sous un bon éclairage, en respectant une séquence d'actions rigoureuse :

  1. Marquage : une plaque blanche ordinaire est divisée en quatre secteurs à l'aide d'un crayon de couleur. Ils sont étiquetés dans le sens des aiguilles d'une montre : I(O), II(A), III(B).
  2. Dépôt des réactifs : de grosses gouttes de sérum sont déposées dans les carrés marqués (en utilisant impérativement deux lots différents pour chacun des trois groupes).
  3. Prélèvement sanguin : la pulpe du doigt du patient est désinfectée à l'alcool et piquée à l'aide d'une lancette spéciale. La première goutte de sang qui perle doit être essuyée avec une boule de coton.
  4. Mélange : le sang est transféré tour à tour dans les gouttes de sérum, en utilisant des coins différents d'une lame propre pour chaque échantillon. La goutte de sang doit être nettement plus petite que la goutte de sérum (5 à 10 fois). Les substances sont soigneusement mélangées.
  5. Observation : la plaque est basculée périodiquement. Au bout de 3 minutes, une évaluation préliminaire est réalisée. Ensuite, une goutte de solution isotonique de NaCl est ajoutée à chaque goutte où la réaction a eu lieu, et la plaque est à nouveau basculée. Le résultat définitif est enregistré exactement au bout de 5 minutes.

Évaluation et interprétation des résultats

Au cours de l'observation, le médecin note la présence ou l'absence d'une réaction d'agglutination.

  • Réaction positive : de petits grains et flocons d'érythrocytes agglutinés se forment dans la goutte et ne se disloquent pas après l'ajout de la solution isotonique de NaCl.
  • Réaction négative : la goutte reste parfaitement transparente, conserve une couleur rose uniforme, sans apparition de flocons ni de granulation.

Interprétation des combinaisons :

  • Groupe I (O) : agglutination totalement absente dans toutes les gouttes (avec les sérums des groupes I, II et III des deux lots).
  • Groupe II (A) : réaction négative dans la goutte de sérum II(A), mais positive avec les réactifs I(O) et III(B).
  • Groupe III (B) : réaction négative dans la goutte de sérum III(B), mais positive avec les sérums I(O) et II(A).
  • Groupe IV (AB) : réaction positive avec les trois sérums.

Précision importante pour le groupe IV(AB) : afin d'exclure toute erreur, il est nécessaire de réaliser une réaction de contrôle supplémentaire avec un sérum standard IV(AB). Ce n'est que si cette goutte témoin ne présente aucune agglutination que le diagnostic du groupe IV(AB) est considéré comme définitivement confirmé. Toute combinaison non décrite ci-dessus indique une erreur technique lors de l'examen.

En bref : réponses aux questions sur le sujet

Quelles sont les règles de compatibilité lors de la transfusion de plasma sanguin ?

Les règles de compatibilité lors de la transfusion de plasma sanguin exigent la prise en compte obligatoire du groupe sanguin selon le système ABO du donneur et du receveur, ainsi que la réalisation d'un test biologique. Les règles suivantes s'appliquent à des groupes spécifiques :

  • Plasma des groupes A(II) et B(III) — peut être transfusé aux receveurs de groupe O(I).
  • Plasma O(I) — transfusé exclusivement aux receveurs du même groupe.

Quels sont les types de fausse agglutination lors de la détermination du groupe sanguin ?

Lors de la détermination du groupe sanguin, on distingue deux principaux types de fausse agglutination, caractérisés par l'absence de véritable agglutination tout en présentant l'apparence d'une réaction. Il s'agit de :

  • La pseudo-agglutination — survient en raison du séchage de la goutte et de la formation de « rouleaux » d'érythrocytes.
  • L'agglutination par le froid — se développe lorsque l'examen est réalisé à une température ambiante inférieure à 15 °C.

Pour prévenir un résultat faussement positif, on ajoute une solution isotonique de chlorure de sodium à la goutte et l'on effectue l'examen à une température supérieure à 15 °C.

Quels agglutinogènes et agglutinines caractérisent chacun des quatre groupes sanguins du système ABO ?

Chacun des quatre groupes sanguins du système ABO est caractérisé par un rapport strict entre les agglutinogènes (présents sur les érythrocytes) et les agglutinines (présentes dans le sérum). Normalement, le sang ne contient que des composants hétéronymes.

Groupe sanguinAgglutinogènes érythrocytairesAgglutinines sériques
I (0)absentsα et β
II (A)Aβ
III (B)Bα
IV (AB)A et Babsents

On connaît également des variantes de l'agglutinogène A (A1 et A2), qui forment les sous-groupes correspondants.

Comment mémoriser

Pour mémoriser facilement le marquage des sérums, fiez-vous au nombre de bandes de couleur sur l'étiquette : il correspond toujours au numéro du groupe sanguin. Le premier groupe comporte zéro bande (incolore), le deuxième deux bandes (bleues), le troisième trois (rouges), et le quatrième quatre (jaunes).

Questions des cours et des examens

Dans quel but ajoute-t-on une solution isotonique de NaCl au mélange réactionnel ?

La solution est ajoutée trois minutes après le début de la réaction pour différencier la véritable agglutination de la fausse. Si les flocons formés ne se dissolvent pas lors de l'ajout de NaCl, la réaction est vraie positive.

Que signifie si l'agglutination s'est produite dans toutes les gouttes, y compris le sérum IV(AB) ?

Normalement, le sérum IV(AB) ne doit pas donner de réaction positive. Si la agglutination des érythrocytes se produit absolument partout, cela indique une panagglutination ou une erreur technique — le résultat n'est pas valide.

Où les résultats de la détermination du groupe sanguin sont-ils enregistrés ?

Les informations doivent impérativement être consignées dans le dossier médical et reportées sur sa page de garde. L'enregistrement doit être authentifié par la signature personnelle du médecin ayant réalisé l'examen, avec indication de la date du jour.

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À étudier également sur le sujet

  • Mécanisme de la réaction d'hémagglutination : interaction entre antigènes et anticorps
  • Erreurs lors de la détermination du groupe sanguin : fausse panagglutination
  • Règle d'Ottenberg et situations extrêmes en transfusiologie
  • Règles de transfusion du plasma : compatibilité dans le système AB0
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