Inmunodiagnóstico

Áreas de aplicación de los métodos inmunológicos

En la práctica de laboratorio moderna, los métodos inmunológicos se aplican en tres direcciones fundamentalmente diferentes:

1. Resolución de tareas no inmunológicas. El análisis inmunoquímico se utiliza ampliamente para la determinación cuantitativa de hormonas y otras moléculas fisiológicamente significativas en el suero sanguíneo. En el pasado se empleaba el radioinmunoensayo, hoy en día se utiliza el análisis de ligandos inmunes (principalmente ELISA) y el inmunoblotting. Las ventajas de estos métodos son su altísima especificidad, sensibilidad y sencillez. Sin embargo, su relativa baratura se ha perdido debido al alto costo del equipo de registro moderno. Estos métodos pertenecen propiamente al inmunodiagnóstico solo cuando se miden moléculas que participan en procesos inmunes (anticuerpos, citocinas).
2. Evaluación del estado inmunitario. Es una caracterización integral del estado del sistema inmunitario sin el objetivo de detectar una inmunopatología específica. Se utiliza para estudiar las características regionales de la inmunidad, evaluar el impacto de la ecología o la relación de la inmunidad con el genotipo HLA. En la práctica clínica existe cierta «desconexión» de la evaluación del estado respecto a las tareas reales de tratamiento.
3. Inmunodiagnóstico (en sentido estricto). Está dirigido a la búsqueda de alteraciones específicas en el paciente. El principal problema ético del inmunodiagnóstico es la prescripción al paciente de pruebas costosas que de ninguna manera facilitan el diagnóstico ni contribuyen a mejorar la terapia.

Evolución de los métodos y aislamiento de células

Históricamente, el inmunodiagnóstico comenzó con el diagnóstico de infecciones, patologías alérgicas, tipificación de grupos sanguíneos y de histocompatibilidad. En la década de 1970 se produjo un cambio de paradigma: los médicos comenzaron a evaluar masivamente las subpoblaciones de linfocitos y la concentración de inmunoglobulinas séricas. El objetivo cambió de diagnosticar procesos infecciosos activos a detectar estados de inmunodeficiencia.

Un avance clave en inmunología fue el desarrollo de un método simple para aislar linfocitos (a menudo llamados mononucleares debido a la mezcla con otras células).

• Principio: centrifugación de la sangre en un gradiente de densidad.
• Medio: una mezcla de polisacárido Ficoll y un agente de contraste radiológico (verografin, hipaque o pac).
• Resultado: después de la centrifugación, en el fondo se forma un sedimento (eritrocitos, neutrófilos segmentados, eosinófilos, basófilos y la mayoría de los monocitos). Encima de la capa densa del medio se forma un anillo, donde se acumulan los linfocitos con una mezcla de células dendríticas y los monocitos restantes.

Estándares modernos y problemas de la práctica clínica

Antiguamente se utilizaba el método de formación de rosetas para identificar células, el cual hoy en día se considera completamente inadecuado. La etapa moderna de desarrollo fue posible gracias a la tecnología de hibridomas y la creación de anticuerpos monoclonales. Esto permitió identificar las células con precisión mediante la unión de anticuerpos a sus receptores.

Actualmente, la gran mayoría de los problemas de la inmunología clínica se resuelven mediante dos tecnologías altamente estandarizadas:

• Ensayo por inmunoabsorción enzimática (ELISA) — para factores humorales.
• Citometría de flujo láser — para el estudio de células.

Al mismo tiempo, aún no se ha resuelto el problema de la falta de estándares claros para la caracterización funcional de las células inmunitarias.

Cabe destacar por separado la diferencia en los enfoques de diagnóstico. En la práctica nacional, la evaluación del estado inmunitario comenzó a prescribirse de manera excesiva, a la par de los análisis rutinarios de sangre y orina, aunque los médicos a menudo carecen de la cualificación necesaria para interpretar adecuadamente estos datos. Al mismo tiempo, según las estrictas recomendaciones de la OMS, la inmunofenotipificación celular está indicada únicamente para el diagnóstico de tres afecciones: SIDA, inmunodeficiencias primarias y enfermedades linfoproliferativas.

Preguntas de clases y exámenes

Qué más repasar sobre el tema

• Principios del ensayo por inmunoabsorción enzimática (ELISA) y del inmunoblotting
• Diseño y principios de funcionamiento del citómetro de flujo láser
• Tecnología de hibridomas y síntesis de anticuerpos monoclonales
• Mecanismos de la centrifugación en gradiente de densidad (Ficoll-Verografin)
• Relación entre la inmunidad y el genotipo HLA

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