Normas de recogida y transporte del biomaterial
Para los estudios rutinarios, el paciente realiza la recogida de la muestra por sí mismo. El principal problema de la fase preanalítica radica en que, a temperatura ambiente, la microflora de la orina se multiplica con rapidez. Esto provoca un aumento artificial en el número de bacterias y resultados falsos positivos. Según la normativa, el transporte de la muestra al laboratorio y el inicio del estudio no deben superar 1–2 horas.
Algoritmo para la recogida autónoma:
- Higiene: es necesario lavar minuciosamente las manos y la zona de los genitales externos.
- Recipiente: se utiliza un contenedor estéril (la tapa debe retirarse con cuidado, sin tocar los bordes bajo ningún concepto).
- Técnica del «chorro medio»: la primera porción de orina se desecha en el inodoro. A continuación, se interrumpe la micción y se llena el contenedor con la porción media hasta la mitad de su volumen. Después, se cierra herméticamente.
Los métodos de recogida alternativos se emplean en raras ocasiones. El cateterismo no se utiliza para el diagnóstico rutinario debido al alto riesgo de introducir una infección. La punción suprapúbica está indicada únicamente en casos específicos y clínicamente justificados.
Técnica de siembra cuantitativa (Método de Gold)
Para el aislamiento de un cultivo puro de microorganismos y el recuento de bacterias se utiliza la siembra por estría en sectores. Como medios de cultivo se emplean agar CLED (agar cistina-lactosa-deficiente en electrolitos) o agar sangre al 5%.
Para el procedimiento se utiliza un asa bacteriológica estándar de 2 mm de diámetro, que toma exactamente 0,005 ml de biomaterial.
Técnica de siembra por sectores:
- La placa de Petri se divide convencionalmente en 4 sectores: A, I, II y III.
- Sector A: se realiza la siembra primaria de la orina mediante estrías densas (30–40 estrías).
- El asa se esteriliza en la llama del mechero.
- Sector I: se realizan 4 estrías desde el sector A hacia el sector I.
- Sector II: de manera similar, se realizan 4 estrías desde el sector I hacia el sector II.
- Sector III: se realizan 4 estrías desde el sector II hacia el sector III.
Tras la siembra, las placas se incuban en estufa a una temperatura de $37^\circ\text{C}$ durante un período de 24 a 72 horas.
Interpretación del recuento de colonias y valoración clínica
La evaluación del grado de colonización se realiza contando las colonias desarrolladas por sectores, lo que permite extrapolar los datos a 1 ml de orina. Cuanto más lejos se extienda el crecimiento a través de los sectores, mayor será el grado de bacteriuria:
- Crecimiento solo en el sector A: colonización baja y moderada (desde $<1000$ hasta $50\,000$ cuerpos microbianos por 1 ml).
- Crecimiento en los sectores A e I: colonización alta (desde $100\,000$ hasta $1$ millón).
- Crecimiento en los sectores A, I y II: colonización muy alta ($5–10$ millones).
- Crecimiento en todos los sectores: colonización crítica ($100$ millones o más).
La principal tarea clínica es diferenciar la infección de la contaminación (contaminación de la muestra por la microflora normal).
Criterios de diferenciación:
- Contaminación: recuento bacteriano inferior a $10^3$ UFC/ml, se detecta una asociación (policultivo) de varias especies de microorganismos.
- Resultado dudoso: título límite de $5 \times 10^3$ UFC/ml. Requiere un nuevo estudio.
- Proceso infeccioso: umbral diagnóstico $\ge 10^4$ UFC/ml. Habitualmente se detecta un cultivo puro del patógeno.
Tras el aislamiento del cultivo puro, se realiza su identificación y se determina el antibiograma. La modificación dinámica del grado de bacteriuria (disminución del título) es utilizada por los médicos para controlar la eficacia del tratamiento prescrito.
En resumen: respuestas a preguntas sobre el tema
¿Qué tipos de bacterias causan con más frecuencia enfermedades inflamatorias de las vías urinarias?
Las fuentes señalan a Escherichia coli uropatógena (E. coli), bacterias del género Klebsiella — K. pneumoniae subsp. pneumoniae y K. oxytoca, así como estafilococos y algunos hongos como agentes causales de infecciones urinarias o afectación renal.
¿Qué métodos alternativos de recogida de biomaterial se emplean en la práctica clínica y cuáles son sus indicaciones estrictas?
En la práctica clínica, además de la recogida de la porción media de orina, se emplean los siguientes métodos alternativos de toma de muestras: - Cateterismo (catheterismus) — se utiliza en hospitales por indicaciones estrictas en caso de traumatismos uretrales, tras cirugías y cuando se requiere un drenaje prolongado. - Punción suprapúbica (punctio supra pubem) — se emplea en casos determinados y como alternativa al cateterismo.
¿Qué métodos de cuantificación de la bacteriuria existen además del método de Gold?
El método de diluciones seriadas.
Para recordar fácilmente el principio de evaluación del crecimiento, utilice la regla de las «olas»: la primera ola (solo el sector A) corresponde a la flora tolerable. Si la ola llega hasta el sector I, ya se trata de una infección. El crecimiento hasta el sector II indica una colonización grave, y el crecimiento microbiano en los cuatro sectores representa una carga bacteriana crítica.
Preguntas de clases y exámenes
¿Por qué la orina no debe conservarse durante mucho tiempo a temperatura ambiente?
A temperatura ambiente, la microflora de la orina se multiplica muy rápidamente. Esto conduce inevitablemente a resultados falsos positivos debido al aumento artificial en el número de bacterias.
¿Se puede aplicar el cateterismo para la recogida convencional de orina para urocultivo?
No, el cateterismo no se emplea para los estudios microbiológicos rutinarios, ya que este procedimiento conlleva un alto riesgo de introducir una infección en las vías urinarias.
¿Cómo distinguir una inflamación real de la contaminación accidental de la muestra?
En la contaminación, el título bacteriano es inferior a 10³ UFC/ml y se descubre una mezcla de diferentes microorganismos. La verdadera infección se caracteriza por una bacteriuria elevada (a partir de 10⁴ UFC/ml), representada con mayor frecuencia por un cultivo puro.
Qué más repasar sobre el tema
- Características de los medios de cultivo: agar CLED y agar sangre al 5%
- Algoritmo para la identificación bioquímica del cultivo puro aislado
- Metodología para la realización del antibiograma
- Monitorización del tratamiento e interpretación de los cambios en el título de bacteriuria
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