Reglas generales de la etapa preanalítica
Para estudiar las causas de las infecciones respiratorias se utilizan el esputo, los frotis nasales y faríngeos, el contenido bronquial (tras broncoscopia) o el aspirado traqueal.
El requisito principal para todos los tipos de biomaterial es el cumplimiento de una estricta asepsia durante la recolección y el uso de contenedores estériles. El intervalo de tiempo entre la toma de la muestra y su siembra en el laboratorio no debe superar 1–2 horas. Si se infringe este plazo, la microflora normal que inevitablemente entra en la muestra empezará a multiplicarse de forma activa. Además, pueden iniciarse procesos de putrefacción y fermentación, lo que invalidará los resultados del estudio.
Recolección de esputo (vías respiratorias inferiores)
El esputo se recolecta por la mañana, durante un acceso de tos, en un recipiente estéril con tapa de cierre hermético. Es importante vigilar que la saliva no penetre en el contenedor. Si el esputo se expectora con dificultad, el día anterior al estudio se le recetan al paciente fármacos expectorantes.
Antes de recolectar el material, el paciente debe:
- Cepillarse los dientes, pero estrictamente sin pasta dental, ya que esta contiene componentes antibacterianos capaces de destruir al agente causal.
- Enjuagarse la boca con agua simple hervida. Esto eliminará mecánicamente los restos de comida, el epitelio descamado y una parte de los microbios de la cavidad oral, reduciendo el riesgo de contaminación.
Frotis faríngeos (vías respiratorias superiores)
A diferencia de la recolección de esputo, antes de tomar un frotis faríngeo no se debe enjuagar la boca. El procedimiento se realiza ya sea en ayunas o 2–3 horas después de comer o beber.
El médico presiona la lengua con un depresor y pasa un hisopo estéril entre los pilares amigdalinos, por la úvula y la pared posterior de la faringe. Es sumamente importante no tocar los labios, las mejillas ni la lengua para evitar la introducción de microflora de estas zonas. Si hay un exudado purulento en la garganta, se pasa el hisopo por el límite entre el tejido sano y el inflamado, que es precisamente donde se acumula la mayor cantidad de bacterias. Tras la toma, el hisopo se introduce de inmediato en un tubo de ensayo con un medio de transporte especial.
Métodos alternativos de toma
Si no hay esputo o este es escaso, se utilizan los lavados bronquiales. Durante la endoscopia, los bronquios se lavan con solución salina fisiológica estéril, que luego se recolecta. Sin embargo, este método tiene desventajas: la secreción se diluye fuertemente, la concentración de bacterias cae de 10 a 1000 veces en comparación con el esputo habitual, y la propia solución salina puede tener un efecto letal sobre algunos microbios. El procedimiento es invasivo y laborioso.
Ante infiltrados o abscesos pulmonares, se realiza una punción transtorácica. Este método es el más informativo si el absceso aún no se ha abierto hacia un bronquio de drenaje. El material punzado obtenido se siembra en medios de cultivo (agar sangre, agar sal manitol, medio de Endō), primero frotándolo con un hisopo en una pequeña área y luego distribuyéndolo en estrías por la placa.
Interpretación de resultados
Dado que las vías respiratorias superiores están normalmente densamente pobladas por microorganismos, cualquier material se contaminará inevitablemente al pasar a través de ellas. Por lo tanto, simplemente encontrar una bacteria no es suficiente; es necesario determinar su cantidad.
Para la evaluación se utiliza un método semicuantitativo, contando las colonias en un medio de cultivo sólido:
- Grado I (hasta 10 colonias) y Grado II (10–25 colonias) se consideran portación o contaminación incidental.
- Grado III (a partir de 50 colonias) y Grado IV (crecimiento confluente) indican que el microbio aislado es muy probablemente el agente causal de la enfermedad.
El diagnóstico definitivo se establece teniendo en cuenta el grado de colonización, el predominio de una sola especie microbiana (monocultivo), los datos de la microscopia del frotis y el cuadro clínico de la enfermedad.
En resumen: respuestas a preguntas sobre el tema
¿Qué criterios citológicos en la microscopia del frotis permiten evaluar la idoneidad del esputo para el cultivo bacteriológico?
La idoneidad del esputo para el estudio microbiológico se evalúa según la cantidad de leucocitos y células epiteliales en el frotis teñido con tinción de Gram. Criterios de una muestra de calidad al observarla al microscopio (con aumento bajo, al menos 20 campos microscópicos):
- Neutrófilos (leucocitos polimorfonucleares neutrófilos): más de 25 células por campo microscópico.
- Células epiteliales (epitelio plano de la orofaringe): menos de 10 células por campo microscópico.
- Microorganismos: predominan en la preparación bacterias de un solo tipo morfológico.
Si el frotis abunda en epitelio y es escaso en leucocitos, el estudio no es aconsejable debido al alto riesgo de contaminación con el contenido de la cavidad oral.
¿Qué bacterias patógenas son con mayor frecuencia los verdaderos agentes causales de las infecciones de las vías respiratorias inferiores?
En las fuentes bibliográficas, entre los agentes bacterianos de las neumonías se indican:
Entre las grampositivas se encuentran:
- neumococos (Streptococcus pneumoniae);
- estreptococos (Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans);
- estafilococos (Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus).
Entre las gramnegativas se encuentran:
- bacilo de la influenza (Haemophilus influenzae);
- klebsielas (Klebsiella pneumoniae);
- bacilo piociánico (Pseudomonas aeruginosa);
- bacilo entérico (Escherichia coli);
- legionela (Legionella pneumophila).
La flora atípica incluye micoplasmas y clamidias. En las neumonías nosocomiales también se indican Acinetobacter spp.
Preguntas de clases y exámenes
¿Por qué no se debe cepillar los dientes con pasta al recolectar esputo?
Las pastas dentales contienen sustancias bactericidas que pueden destruir a los microorganismos patógenos en la muestra y dar lugar a un resultado falso negativo.
¿Cuál es la diferencia en la preparación del paciente para la recolección de esputo y de un frotis faríngeo?
Antes de recolectar el esputo, es necesario enjuagarse la boca con agua hervida para eliminar la flora de la cavidad oral. Antes del frotis faríngeo está terminantemente prohibido enjuagarse la boca para no arrastrar al agente causal.
¿Cómo distinguir al agente causal verdadero de la microflora normal en el cultivo de esputo?
El criterio principal es la cantidad de colonias desarrolladas. Un crecimiento abundante (grados III y IV, más de 50 colonias) apunta al agente causal, mientras que un crecimiento escaso (hasta 25 colonias) se considera contaminación por la flora normal.
Qué más repasar sobre el tema
- Medios de cultivo para la siembra (agar sangre, agar sal manitol, medio de Endō)
- Método de diluciones seriadas para determinar la concentración exacta de microbios
- Microscopia del frotis primario
- Medios de transporte para frotis faríngeos
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