Curva de crescimento em cultura estática
Se os microrganismos forem colocados em um meio líquido fechado (sem adição de novos nutrientes e sem remoção de toxinas), o desenvolvimento deles será limitado pelos recursos. No gráfico em que o tempo é plotado no eixo x e o logaritmo do número de células no eixo y, quatro etapas são claramente distinguidas:
- Fase lag (2–5 horas). Período de adaptação após a inoculação. As células ainda não se dividem, mas seu metabolismo funciona no limite — há intensa síntese de novas enzimas para a degradação de substratos de um meio específico.
- Fase exponencial (logarítmica). Tempo de taxa máxima e constante de divisão. Todas as células neste período têm tamanho padrão e uma quantidade estável de proteína.
- Fase estacionária. O crescimento cessa. Ocorre um equilíbrio: o número de células formadas é igual ao número de células que morreram. Isso acontece devido ao esgotamento de nutrientes, queda nos níveis de oxigênio, alta densidade populacional e acúmulo de toxinas.
- Fase de declínio (morte). Os microrganismos morrem em massa sob a ação de produtos ácidos de seu próprio metabolismo ou como resultado de autólise (autodestruição por enzimas). O estágio pode durar de dez horas a várias semanas.
Particularidades do crescimento em meios de cultura
As manifestações da atividade vital dependem do estado físico do substrato:
- Meios líquidos. Na maioria das vezes, as bactérias causam turvação difusa do líquido, formam uma película superficial ou precipitam-se no sedimento de fundo. A exceção são as leptospiras (Leptospira), cujo crescimento não altera visualmente a transparência do meio.
- Meios sólidos. Aqui formam-se colônias isoladas — a prole de uma única célula parental (clones). A superfície das colônias pode ser lisa e brilhante (formas S, de smooth) ou rugosa e fosca (formas R, de rough). O tamanho, a cor e a consistência desses aglomerados são chamados de propriedades culturais e servem como chave para a identificação do micróbio.
Classificação de pigmentos bacterianos
Alguns microrganismos são capazes de sintetizar pigmentos que os protegem contra a radiação ultravioleta, neutralizam radicais tóxicos de oxigênio e podem atuar como antibióticos para suprimir competidores. Os pigmentos são classificados por composição química e solubilidade:
- Carotenoides: pigmentos lipossolúveis de cor vermelha, laranja ou amarela. Característicos dos gêneros Mycobacterium e Micrococcus.
- Pirrólicos: solúveis em álcool. Por exemplo, a prodigiosina de cor vermelha, que é produzida por Serratia marcescens.
- Fenazínicos: solúveis em água, razão pela cual colorem o próprio meio de cultura. Um exemplo típico é a piocianina azul-esverdeada secretada pela bactéria Pseudomonas aeruginosa.
- Melaninas: pigmentos insolúveis pretos ou marrons encontrados em bactérias do gênero Porphyromonas.
Opções alternativas de reprodução e repouso
A fissão binária não é o único caminho de reprodução dos procariotos. No processo de evolução, outros mecanismos também surgiram:
- Os actinomicetos reproduzem-se por fragmentação de filamentos (hifas).
- As micoplasmas apresentam polimorfismo acentuado: podem se dividir transversalmente, brotar ou fragmentar-se com a formação de corpúsculos elementares.
- As clamídias têm um ciclo bifásico complexo. O corpúsculo elementar extracelular, pequeno e incapaz de se dividir, infecta a célula, transformando-se dentro dela em um corpúsculo reticular grande, que se divide ativamente em dois e forma uma nova geração de corpúsculos elementares.
- As espiroquetas (por exemplo, o agente causador da sífilis Treponema pallidum), sob condições desfavoráveis, contraem-se em cistos, que posteriormente se decompõem em pequenos grânulos — a base para novas células.
Formas viáveis não cultiváveis (VBNC) Se as condições ambientais tornam-se críticas, as bactérias não esporuladas podem entrar em um estado especial de repouso. Elas param de crescer em meios padrão (a divisão para), mas mantêm a atividade metabólica. Só é possível diagnosticá-las por meios moleculares-genéticos. Ao entrar em contato com protozoários, habitantes do solo ou fitohormônios, ocorre a reversão — as células saem da dormência, restaurando a capacidade de se reproduzir e causar infecções.
Para memorizar a sequência das 4 fases de crescimento, use a frase: Fase lag, Exponencial, Estacionária, Declínio.
Questões de aulas e exames
Por que o número de bactérias não aumenta na fase lag?
Durante este período, as células estão ocupadas se adaptando às novas condições. Elas não se dividem, mas metabolizam ativamente, sintetizando enzimas necessárias para a utilização de nutrientes do meio.
Como os biotecnólogos alcançam o crescimento bacteriano contínuo na indústria?
Utiliza-se o método de cultura contínua: nutrientes frescos são adicionados de forma doseada e contínua ao sistema e, paralelamente, os metabólitos são removidos. Isso permite manter artificialmente a população na fase logarítmica.
Qual é o perigo epidemiológico das formas não cultiváveis (VBNC)?
Elas permitem que bactérias patogênicas aguardem condições desfavoráveis durante os períodos interepidêmicos, passando despercebidas na cultura bacteriológica clássica e, em seguida, recuperando sua virulência ao entrarem no organismo.
O que mais estudar sobre o tema
- Dependência da duração da fase lag em relação à idade do material de inoculação
- Especificidade da esporulação na família Streptomycetaceae
- Mecanismos de autólise celular na fase de declínio
- Aplicação de corantes indicadores de potencial redox
- A relação entre as formas S e R de colônias (dissociação bacteriana)
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