生物学诊断法的应用目的
当 in vitro（体外）检测手段不足时，需应用生物学诊断法。实验性动物感染的主要目的包括：
- 分离病原体。这是该方法的主要优点。在处理原则上无法在人工培养基上生长的微生物时，它是不可替代的。
- 评估致病性。该方法能够准确确定分离微生物的毒力强度并明确其产生的毒素类型。
- 复制感染模型。在活体生物中可以复现疾病的临床表现，详细研究发病机制的各个阶段，并分析“微生物-宿主”系统中的复杂相互作用。
- 免疫学与药理学研究。生物测定对于研究宿主的免疫应答以及评估新型抗菌药物和疫苗的实际效力和活性是必不可少的。
受试标本的接种途径
为了使感染过程尽可能典型地发展，需根据病原体的嗜性选择不同的途径接种标本。动物（小鼠、大鼠、豚鼠或家兔）的选择和接种途径由感染性病原体的生物学特性决定。
- 肠内接种：经口（口服）给予标本。
- 呼吸道接种：将感染性病原体直接输送至呼吸道。
- 肠外接种：绕过消化道的注射方法。包括腹腔内、静脉内、肌肉内、皮下和皮内注射。
- 特定部位接种：针对特殊感染的复杂操作。例如，前房注射、硬膜下注射（需预先进行颅骨钻孔）或枕大池注射（大脑大池注射）。
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方法的优缺点
与其他诊断方法一样，in vivo（体内）研究也有其优势与局限性。
优点：
- 极高的灵敏度。活体生物对极低剂量的病原体也会产生反应，而这些病原体可能无法通过其他方法检出。
- 能够分离难培养病原体。典型的例子是麻风分枝杆菌和梅毒螺旋体，它们无法在实验室的标准培养基上生长。
缺点：
- 种属不敏感性。实验动物对大多数人兽共患病或人类传染病（仅感染人类的疾病）在遗传上不敏感。
- 经济成本高。该方法需要大量资金投入用于购买纯种动物、提供其充足的营养，以及建设和定期维护专门的动物实验室（屏障设施）。
简述：主题相关问答
在进行生物测定评估微生物毒力时，使用哪些单位以及具体如何评估？
在进行 in vivo 生物测定时，通过测定致死剂量来评估实验动物体内的毒力程度。感染剂量取决于感染门户：通过呼吸道感染可能仅需 1–2 个细胞，而通过经口途径感染同一微生物则需要数千个细胞。引文未提及毒力程度的计量单位。
如何对死亡实验动物的器官进行细菌学检查？
对于包括脾脏、肝脏、淋巴结及其他器官在内的剖检标本，细菌学检查包括：对病理标本涂片进行革兰氏染色及荚膜染色镜检，并通过接种肉汤琼脂平板以及肉汤试管或霍廷格培养基来分离纯培养物。
课堂与考试常见问题
当微生物属于难培养且无法在人工培养基上繁殖时（例如麻风分枝杆菌或梅毒螺旋体）。
在这种情况下，感染敏感动物是获得研究用培养物的唯一途径。
如何为生物测定选择实验动物？
选择标准完全取决于特定病原体的生物学特性——动物必须对该感染易感。
为什么实验动物不适用于研究所有感染？
动物对仅侵袭人类的人类传染病病原体具有天然免疫力，因此无法在其身上复制此类疾病的临床表现。
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该主题的其他拓展内容
- 微生物毒力的评估标准与方法
- 体内（in vivo）细菌毒素分型方法
- 麻风与梅毒的发病机制特点
- 动物实验室的组织与操作规范
- 动物体内疫苗活性的临床前评估
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