Mecanismo da reação
A essência da reação consiste na formação de uma rede única (malha) de antígenos e anticorpos. Os anticorpos atuam como "pontes" que conectam os antígenos particulados entre si.
A extensão da aglutinação depende da classe das imunoglobulinas envolvidas:
- IgM possuem estrutura pentamérica, permitindo que capturem várias bactérias ou células simultaneamente, formando grandes aglomerados.
- IgG são monômeros, portanto ligam apenas células vizinhas, construindo também uma rede.
Tipos de diagnosticuns
Dependendo do antígeno a ser detectado, diferentes tipos de diagnosticuns (suspensões microbianas) são utilizados nas reações:
- Diagosticum O: preparado a partir de bactérias inativadas pelo calor. O antígeno O somático termoestável é preservado. A reação com este diagnosticum produz uma aglutinação finamente granular.
- Diagnosticum H: elaborado com bactérias inativadas por formalina. Nesse caso, o antígeno H flagelar termolábil é preservado. A aglutinação tem caráter macroflocular e ocorre mais rapidamente do que a aglutinação O.
Significado clínico
A reação de aglutinação é amplamente utilizada na prática médica:
- Sorodiagnóstico. Permite a quantificação do título de anticorpos antimicrobianos específicos no soro sanguíneo do paciente.
- Identificação do agente etiológico (sorotipagem). Com o uso de soros diagnósticos conhecidos, é possível estabelecer com precisão a espécie de bactérias isoladas de um paciente.
- Imunohematologia. Utilizada para a determinação dos grupos sanguíneos com o uso de anticorpos monoclonais contra aloantígenos eritrocitários.
Reação de aglutinação em tubo
Este método de realização da reação em tubos de ensaio é utilizado para a contagem precisa de anticorpos.
Etapas da realização:
- Prepara-se uma série de diluições seriadas do soro sanguíneo.
- Adiciona-se uma quantidade igual de diagnosticum (suspensão de microrganismos inativados) a todos os tubos.
- A mistura é incubada por várias horas a 37 °C.
Como resultado, determina-se o título do soro — a diluição máxima na qual a formação de precipitado (aglutinação) ainda é visualmente perceptível.
Reações cruzadas
Na sorotipagem, pode surgir um problema: microrganismos estreitamente relacionados frequentemente possuem antígenos comuns. Isso leva a resultados falso-positivos — o mesmo soro aglutina bactérias diferentes.
Para resolver esse problema, o método de Castellani (1902) propõe o uso de soros aglutinantes adsorvidos. Todos os anticorpos de reação cruzada são removidos do soro normal por precipitação com bactérias relacionadas. Após isso, apenas anticorpos específicos que reagem estritamente com o patógeno em questão permanecem no soro.
Resumo: perguntas e respostas sobre o tema
Quais são os tipos de reação de aglutinação quanto ao método de execução, além da reação em tubo?
Além da reação em tubo (ampliada), destacam-se a reação orientativa (em lâmina), a reação indireta e outras modificações. A reação orientativa é realizada misturando uma gota de soro e a cultura pura do patógeno em uma lâmina de microscopia.
O que é a reação de hemaglutinação indireta (passiva) (RHAI)?
A reação de hemaglutinação indireta (passiva) baseia-se no uso de eritrócitos como suportes para visualizar a interação entre antígeno e anticorpo. Na variante clássica para detecção de anticorpos, utiliza-se um diagnosticum eritrocitário antigênico, composto por eritrócitos com antígenos conhecidos. Na reação de hemaglutinação indireta reversa para detecção de antígenos, utiliza-se um diagnosticum eritrocitário anticorpo com anticorpos conhecidos.
Quais condições físico-químicas do meio são necessárias para ocorrência ideal da reação de aglutinação?
Para a ocorrência ideal da reação de aglutinação, é obrigatória a presença de eletrólitos, como a solução isotônica de cloreto de sódio, além da manutenção do pH ideal do meio.
Questões de aulas e exames
O que é o título do soro?
É a maior diluição do soro sanguíneo do paciente na qual a precipitação ainda é visualmente detectável na reação de aglutinação em tubo.
Para que servem os soros adsorvidos?
Eles são necessários para excluir reações cruzadas com bactérias relacionadas que possuem antígenos comuns. Nesses soros, apenas os anticorpos específicos para o patógeno desejado são mantidos.
O que mais estudar sobre o tema
- Reação de aglutinação orientativa em lâmina
- Reação de aglutinação indireta
- Métodos de imunofluorescência, ELISA e RIA (visão geral)
- Anticorpos monoclonais em imunohematologia
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