Objetivos do uso do método biológico
O método biológico de diagnóstico é utilizado nos casos em que as possibilidades de trabalho in vitro (em tubo de ensaio) são insuficientes. Os principais objetivos da infecção experimental de animais incluem:
- Isolamento do agente etiológico. Esta é a principal vantagem do método. É indispensável ao trabalhar com microrganismos que, a princípio, não crescem em meios de cultura artificiais.
- Avaliação da patogenicidade. O método permite determinar com precisão o grau de virulência do micróbio isolado e estabelecer o tipo de toxina por ele produzida.
- Modelagem de infecção. Em um organismo vivo, é possível reproduzir o quadro clínico da doença, estudar detalhadamente as etapas da patogênese e analisar a complexa interação no sistema «microrganismo – macro-organismo».
- Imunologia e farmacologia. A bioprova é necessária para estudar a resposta imune do macro-organismo, bem como para avaliar a eficácia e a atividade reais de novos agentes antimicrobianos e vacinas.
Vias de administração do material investigado
Para que o processo infeccioso se desenvolva da maneira mais adequada, o material é administrado por diversas vias, dependendo do tropismo do patógeno. A escolha do animal (camundongos, ratos, porquinhos-da-índia ou coelhos) e da via de administração é ditada pelas características biológicas do agente infeccioso.
- Entérica: administração do material pela boca (via oral).
- Respiratória: entrega do agente infeccioso diretamente nas vias respiratórias.
- Parenteral: técnicas de injeção que contornam o trato digestivo. Incluem a administração intraperitoneal, intravenosa, intramuscular, subcutânea e intradérmica.
- Em lócus especiais: manipulações complexas para infecções específicas. Por exemplo, administração na câmara anterior do olho, via subdural (requer craniotomia prévia) ou suboccipital (injeção na cisterna magna do cérebro).
Vantagens e desvantagens do método
Como qualquer abordagem diagnóstica, o estudo in vivo tem seus pontos fortes e fracos.
Vantagens:
- Sensibilidade altíssima. O organismo vivo reage mesmo a doses mínimas do patógeno, que podem não ser detectadas por outros métodos.
- Possibilidade de isolar patógenos de cultura exigente. Exemplos clássicos são os agentes causadores da lepra e da sífilis, que não podem ser cultivados em meios de cultura padrão em laboratório.
Desvantagens:
- Insuscetibilidade de espécie. Os animais de laboratório são geneticamente insuscetíveis à maioria das infecções antroponóticas — doenças que afetam exclusivamente os seres humanos.
- Altos custos econômicos. O método exige investimentos financeiros significativos para a aquisição de animais de raça, sua nutrição adequada, bem como para a construção e manutenção regular de um biotério especializado.
Resumo: perguntas e respostas sobre o tema
Em quais unidades e como exatamente é avaliado o grau de virulência de um microrganismo ao realizar a bioprova?
Ao realizar a bioprova in vivo, o grau de virulência é avaliado em animais de laboratório através da determinação das doses letais. A dose infectante depende da porta de entrada da infecção: 1 a 2 células podem ser suficientes para a infecção pelas vias respiratórias, enquanto milhares de células são necessárias para a infecção oral do mesmo microrganismo. As unidades de medida do grau de virulência não são especificadas na fonte citada.
Como é realizado o exame bacteriológico dos órgãos de um animal de laboratório falecido?
Para o material de necrópsia, incluindo baço, fígado, linfonodos e outros órgãos, o exame bacteriológico inclui a microscopia de esfregaços do material patológico com coloração de Gram e métodos de identificação de cápsulas, bem como o isolamento da cultura pura por semeadura em placa com ágar infusão de carne-peptona e em tubo de ensaio com caldo de carne-peptona ou meio de Hottinger.
Questões de aulas e exames
Se o microrganismo for de cultivo exigente e incapaz de se multiplicar em meios de cultura artificiais (por exemplo, os agentes causadores da lepra ou da sífilis).
Nessas situações, a infecção de um animal suscetível é a única maneira de obter uma cultura para estudo.
Como o animal de laboratório é escolhido para a bioprova?
O critério de escolha depende exclusivamente das características biológicas do patógeno específico — o animal deve ser suscetível àquela infecção.
Por que os animais de laboratório não são adequados para o estudo de todas as infecções?
Os animais possuem insuscetibilidade natural aos agentes causadores de infecções antroponóticas, que afetam apenas os seres humanos; portanto, é impossível reproduzir o quadro clínico dessas doenças neles.
O que mais estudar sobre o tema
- Critérios e métodos de avaliação da virulência de microrganismos
- Métodos de tipagem de toxinas bacterianas in vivo
- Características da patogênese da lepra e da sífilis
- Regras de organização e funcionamento do biotério
- Avaliação pré-clínica da atividade de vacinas em animais
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