Mekanisme reaksi
Inti dari reaksi ini adalah pembentukan jaringan tunggal (kisi-kisi) dari antigen dan antibodi. Antibodi berfungsi sebagai «jembatan» unik yang menghubungkan antigen partikulat satu sama lain.
Skala perlekatan bergantung pada kelas imunoglobulin yang terlibat:
- IgM memiliki struktur pentamer, sehingga dapat menangkap banyak bakteri atau sel sekaligus, membentuk kelompok-kelompok besar.
- IgG direpresentasikan sebagai monomer, sehingga hanya mengikat sel-sel yang berdekatan dan juga membentuk jaringan.
Jenis-jenis diagnostikum
Tergantung pada antigen apa yang perlu dideteksi, berbagai jenis diagnostikum (suspensi mikroba) digunakan dalam reaksi:
- O-diagnostikum: disiapkan dari bakteri yang telah dimatikan dengan pemanasan. Dalam hal ini, antigen somatik O yang termostabil tetap terjaga. Reaksi dengan diagnostikum seperti ini menghasilkan aglutinasi berbutir halus.
- H-diagnostikum: dibuat dari bakteri yang dimatikan dengan formalin. Dalam hal ini, antigen flagela H yang termolabil tetap terjaga. Aglutinasi bersifat berflokulasi besar (kasar) dan terjadi lebih cepat daripada aglutinasi O.
Signifikansi klinis
Reaksi aglutinasi secara luas digunakan dalam praktik medis:
- Serodiagnosis. Memungkinkan penentuan kuantitatif titer antibodi antimikroba spesifik dalam serum darah pasien.
- Identifikasi patogen (serotyping). Dengan bantuan serum diagnostik yang diketahui, spesies bakteri yang diisolasi dari pasien dapat ditentukan secara akurat.
- Imunohematologi. Digunakan untuk menentukan golongan darah menggunakan antibodi monoklonal terhadap alloantigen eritrosit.
Reaksi aglutinasi bertingkat (makroskopik)
Metode pengaturan reaksi dalam tabung reaksi ini digunakan untuk penghitungan antibodi secara akurat.
Tahapan prosedur:
- Siapkan serangkaian pengenceran bertingkat dari serum darah.
- Tambahkan jumlah diagnostikum (suspensi mikroba yang dimatikan) yang sama ke semua tabung reaksi.
- Inkubasi campuran selama beberapa jam pada suhu 37 °C.
Hasilnya, titer serum ditentukan — pengenceran maksimum di mana pembentukan endapan (perlekatan) masih dapat terlihat secara visual.
Reaksi silang
Selama serotyping, masalah dapat muncul: mikroorganisme yang berkerabat dekat sering kali memiliki antigen bersama. Hal ini mengarah pada hasil positif palsu — serum yang sama mengaglutinasi bakteri yang berbeda.
Untuk mengatasi masalah ini, metode Castellani (1902) menyarankan penggunaan serum aglutinasi teradsorpsi. Semua antibodi yang bereaksi silang dihilangkan dari serum biasa dengan mengendapkannya menggunakan bakteri yang kerabat. Setelah itu, hanya antibodi spesifik yang tersisa dalam serum, bereaksi secara ketat terhadap patogen tertentu.
Singkatnya: jawaban atas pertanyaan topik
Apa saja jenis reaksi aglutinasi berdasarkan metode pelaksanaannya, selain reaksi bertingkat?
Selain reaksi bertingkat (dalam tabung reaksi), terdapat reaksi orientasi (pada kaca objek), reaksi tidak langsung, dan modifikasi lainnya. Reaksi orientasi dilakukan dengan mencampurkan setetes serum dan biakan murni patogen pada objek kaca.
Apa itu reaksi hemaglutinasi pasif (tidak langsung) (RHP/IHA)?
Reaksi hemaglutinasi tidak langsung (pasif) didasarkan pada penggunaan eritrosit sebagai pembawa untuk memvisualisasikan interaksi antara antigen dan antibodi. Dalam varian klasik untuk mencari antibodi, digunakan diagnostikum eritrosit antigenik yang terdiri dari eritrosit dengan antigen yang diketahui. Dalam reaksi hemaglutinasi tidak langsung terbalik untuk mencari antigen, digunakan diagnostikum eritrosit antibodi dengan antibodi yang diketahui.
Kondisi fisikokimia medium apa saja yang diperlukan agar reaksi aglutinasi dapat berlangsung secara optimal?
Agar reaksi aglutinasi berlangsung optimal, kehadiran elektrolit secara wajib diperlukan, seperti larutan natrium klorida isotonik, serta pemeliharaan nilai pH medium yang optimal.
Soal-soal dari kelas dan ujian
Apa itu titer serum?
Ini adalah pengenceran tertinggi dari serum darah pasien di mana endapan masih terdeteksi secara visual dalam reaksi aglutinasi bertingkat.
Untuk apa serum teradsorpsi digunakan?
Ini diperlukan untuk menyingkirkan reaksi silang dengan bakteri kerabat yang memiliki antigen bersama. Dalam serum tersebut, hanya antibodi spesifik terhadap patogen yang diinginkan yang disisakan.
Topik lain untuk dipelajari
- Reaksi aglutinasi orientasi pada kaca objek
- Reaksi aglutinasi tidak langsung
- Metode imunofluoresensi, ELISA, dan RIA (tinjauan)
- Antibodi monoklonal dalam imunohematologi
Pelajari topik ini secara lengkap dalam kursus "Mikrobiologi"
Di sini adalah ringkasan. Di dalam kursus — semua yang ditanyakan saat kelas dan ujian.
- Panduan praktis lengkap tentang «Reaksi aglutinasi» dan 4.383 halaman materi mata kuliah lainnya
- Tugas dan kuis setelah setiap topik — seperti pada kolokium
- AI-tutor akan menjawab pertanyaan topik kapan saja
- 141 video pembelajaran untuk mata kuliah ini
Topik lain di bagian «Reaksi imunodiagnostik»
Video pembelajaran gratis: mikrobiologiPelajaran singkat dengan ringkasan — tanpa registrasi.
Materi disiapkan oleh staf pengajar WhiteCoat Pro sesuai dengan kurikulum pendidikan kedokteran. Bersifat edukatif.