Principes des propriétés tinctoriales
La capacité des éléments cellulaires et de la substance intercellulaire à fixer les colorants est appelée propriétés tinctoriales. Selon leur nature chimique, les pigments sont classés en plusieurs groupes :
- Basiques (cationiques) : interagissent avec les composants acides, tels que la chromatine nucléaire et les organites riches en ARN. Des exemples frappants sont l'hématoxyline, le bleu de méthylène et l'azur.
- Acides (anioniques) : ont une affinité pour les structures cytoplasmiques basiques et les composants fibreux du tissu conjonctif. Sont inclus l'éosine et la fuchsine acide.
- Neutres : contiennent à la fois des composants acides et basiques.
Méthode standard : hématoxyline et éosine
La méthode la plus répandue en pratique de laboratoire et clinique est l'utilisation combinée de l'hématoxyline et de l'éosine (H&E). L'hématoxyline forme des liaisons stables avec le squelette phosphate-sucre négatif des acides nucléiques, conférant aux noyaux une couleur bleu-violet. L'éosine assure le contraste des structures cytoplasmiques et des granules protéiques en les colorant en tons rose-rouge. Cette approche est suffisante pour les tâches de routine, y compris l'évaluation de la composition cellulaire et le comptage des éléments figurés.
Méthodes spéciales et imprégnation
Pour une étude plus détaillée de la morphologie et la mise en évidence de composés spécifiques, des techniques spéciales sont utilisées :
- Hématoxyline ferrique de Heidenhain : utilisée pour mettre en évidence la striation des fibres musculaires et les disques intercalaires du myocarde.
- Imprégnation au nitrate d'argent : repose sur l'argyrophilie des tissus ; visualise les fibres réticulaires sous forme de réseau noir, les éléments nerveux et les endocrinocytes.
- Sudan III : colore les lipides en orange sur des coupes congelées, évitant ainsi leur dissolution lors de la déshydratation standard.
- Coloration de Mallory : différencie clairement les fibres musculaires des septa conjonctifs, en colorant ces derniers en bleu.
Les basiques en bleu (comme le ciel), les acides en rouge (comme le coucher de soleil). L'hématoxyline aime les noyaux, l'éosine aime le cytoplasme.
Questions des cours et des examens
Pourquoi l'hématoxyline colore-t-elle les noyaux en bleu ?
L'hématoxyline est un colorant basique qui se lie au squelette phosphate-sucre chargé négativement des acides nucléiques, lesquels prédominent dans le noyau.
Quelle méthode est la mieux adaptée pour mettre en évidence la dégénérescence graisseuse ?
La coloration au Sudan III est utilisée sur des coupes congelées, colorant les lipides en orange, car lors de la déshydratation habituelle, les graisses se dissolvent.
Quels sont les résultats de la coloration de Mallory ?
Cette méthode est démonstrative pour le stroma : les septa conjonctifs sont colorés en bleu, ce qui permet de les distinguer facilement du tissu musculaire.
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