Objetivos de uso del método biológico
El método diagnóstico biológico se utiliza en aquellos casos en los que las posibilidades de trabajar in vitro (en el tubo de ensayo) son insuficientes. Los principales objetivos de la infección experimental en animales incluyen:
- Aislamiento del patógeno. Esta es la principal ventaja del método. Es indispensable cuando se trabaja con microorganismos que esencialmente no crecen en medios de cultivo artificiales.
- Evaluación de la patogenicidad. El método permite determinar con precisión el grado de virulencia del microbio aislado y establecer el tipo de toxina que produce.
- Modelado de infecciones. En un organismo vivo es posible reproducir el cuadro clínico de la enfermedad, estudiar detalladamente las etapas de la patogenia y analizar la compleja interacción en el sistema «microorganismo - macroorganismo».
- Inmunología y farmacología. La bioprueba es necesaria para estudiar la respuesta inmunitaria del macroorganismo, así como para evaluar la eficacia y actividad real de nuevos fármacos antimicrobianos y vacunas.
Vías de inoculación del material de estudio
Para que el proceso infeccioso se desarrolle de la manera más adecuada, el material se inocula por diferentes vías según el tropismo del patógeno. La elección del animal (ratones, ratas, cobayas o conejos) y la vía de inoculación están dictadas por las características biológicas del agente infeccioso.
- Entérica: administración del material por vía oral (peroral).
- Respiratoria: entrega del agente infeccioso directamente a las vías respiratorias.
- Parenteral: técnicas de inyección que evitan el tracto digestivo. Incluyen la administración intraperitoneal, intravenosa, intramuscular, subcutánea e intradérmica.
- En locus especiales: manipulaciones complejas para infecciones específicas. Por ejemplo, la inyección en la cámara anterior del ojo, por vía subdural (requiere craneotomía previa) o suboccipital (inyección en la cisterna magna del cerebro).
Ventajas y desventajas del método
Como cualquier enfoque diagnóstico, el estudio in vivo tiene sus puntos fuertes y débiles.
Ventajas:
- Sensibilidad altísima. El organismo vivo reacciona incluso a dosis mínimas del patógeno que pueden no ser detectadas por otros métodos.
- Capacidad para aislar patógenos de difícil cultivo. Los ejemplos clásicos son los agentes causantes de la lepra y la sífilis, que no se pueden cultivar en medios de cultivo estándar en el laboratorio.
Desventajas:
- Inmunidad específica de especie. Los animales de laboratorio son genéticamente insusceptibles a la mayoría de las infecciones antroponóticas, enfermedades que afectan exclusivamente a los seres humanos.
- Altos costos económicos. El método requiere importantes inversiones financieras para la compra de animales de raza, su nutrición adecuada, así como para la construcción y el mantenimiento regular de un vivero especializado.
En resumen: respuestas a preguntas sobre el tema
¿En qué unidades y cómo exactamente se evalúa el grado de virulencia de un microorganismo al realizar una bioprueba?
Al realizar una bioprueba in vivo, el grado de virulencia se evalúa en animales de laboratorio mediante la determinación de las dosis letales. La dosis infecciosa depende de la puerta de entrada de la infección: para la infección por vía respiratoria pueden ser suficientes 1 o 2 células, mientras que para la infección por vía oral del mismo microorganismo se requieren miles de células. Las unidades de medida del grado de virulencia no se especifican en la fuente citada.
¿Cómo se realiza el examen bacteriológico de los órganos de un animal de laboratorio fallecido?
Para el material de autopsia, que incluye el bazo, el hígado, los ganglios linfáticos y otros órganos, el examen bacteriológico incluye la microscopía de frotis del material patológico con tinción de Gram y métodos de detección de cápsulas, así como el aislamiento del cultivo puro mediante siembra en placa con agar nutritivo (caldo nutritivo con peptona) y en tubo de ensayo con caldo nutritivo o medio de Hottinger.
Preguntas de clases y exámenes
Si el microorganismo es de difícil cultivo y no es capaz de multiplicarse en medios de cultivo artificiales (por ejemplo, los agentes causantes de la lepra o la sífilis).
En tales situaciones, infectar a un animal susceptible es la única manera de obtener un cultivo para su estudio.
¿Cómo se elige el animal de laboratorio para la bioprueba?
El criterio de selección depende exclusivamente de las características biológicas del patógeno específico; el animal debe ser susceptible a dicha infección.
¿Por qué los animales de laboratorio no son adecuados para estudiar todas las infecciones?
Los animales tienen una resistencia natural a los patógenos de infecciones antroponóticas que afectan únicamente a los seres humanos, por lo que es imposible reproducir el cuadro clínico de tales enfermedades en ellos.
Qué más repasar sobre el tema
- Criterios y métodos para evaluar la virulencia de los microorganismos
- Métodos de tipificación de toxinas bacterianas in vivo
- Características de la patogenia de la lepra y la sífilis
- Normas de organización y funcionamiento del bioterio
- Evaluación preclínica de la actividad de vacunas en animales
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